液體石蠟保藏法實(shí)際上是斜面保藏法的一種改進(jìn)形式。它的原理基于斜面保藏菌的基礎(chǔ)上，覆蓋一層液體石蠟，創(chuàng)造缺氧環(huán)境而保存于4℃。對(duì)于安徽省六安市無(wú)菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)學(xué)員來(lái)說(shuō)，液體石蠟保藏法是務(wù)必要學(xué)習(xí)掌握的知識(shí)和技能，一起看正文。
安徽省六安市無(wú)菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)知識(shí)之液體石蠟保藏法
1.液體石蠟保藏法
(1)準(zhǔn)備液體石蠟
根據(jù)需要，將液體石蠟進(jìn)行分裝密封，放置于高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)121℃滅菌30min，滅菌完成后放置于40℃恒溫箱中蒸發(fā)水分，約4天，或105℃烘箱中1h，待水分蒸發(fā)完全后，備用。
(2)制備斜面菌種
參看之前文章講到的內(nèi)容。
(3)封液體石蠟
將無(wú)菌干燥的液體石蠟注入上述培養(yǎng)好的斜面上，加入石蠟的量以高于斜面頂端1cm為宜，再將試管密封，直立于4℃左右冷藏保存。
覆蓋滅菌的液體石蠟，一方面可防止因培養(yǎng)基水分蒸發(fā)而引起菌種死亡，另一方面可阻止氧氣進(jìn)入，以減弱代謝作用。要定期添加石蠟保證斜面處于液面以下。
(4)保藏時(shí)間
保藏時(shí)間至少可以達(dá)到1年，甚至更長(zhǎng)。
一般情況，不產(chǎn)芽孢細(xì)菌保藏1年，芽孢菌、放線菌、霉菌可保藏2年，酵母菌可保藏1-2年。
(5)對(duì)象
細(xì)菌，酵母菌，放線菌等。
(6)優(yōu)點(diǎn)
保藏時(shí)間較斜面保藏法長(zhǎng)，操作簡(jiǎn)便。
(7)缺點(diǎn)
需要直立放置，比較耗費(fèi)空間，不便于攜帶。
2.液體石蠟保藏菌種活化
將保藏的斜面取出來(lái)，用接種環(huán)從液體石蠟下挑取少量菌種，適當(dāng)在試管內(nèi)壁輕點(diǎn)幾下，減少石蠟量，然后采用劃線法接種于新鮮平板上培養(yǎng)，待生長(zhǎng)良好，再次傳代，培養(yǎng)。
3.注意事項(xiàng)
(1)液體石蠟易燃，必須注意火災(zāi)。
(2)移植菌種時(shí)，接種針上帶有石蠟和菌體，火焰滅菌時(shí)易飛賤、爆發(fā)，嚴(yán)防感染。
(3)由于取出的菌種帶有一定量的液體石蠟，生長(zhǎng)較慢且有粘性，因此，需要傳代2次。
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