四川省無菌檢驗員培訓(xùn)知識之高效毛細管電泳的基本原理
發(fā)布時間:2025-02-23瀏覽:474
對于四川省無菌檢驗員培訓(xùn)學(xué)員來說,真的可以用學(xué)海無涯來形容,無菌檢驗員的知識要求真的是廣博且具體。本文為大家介紹高效毛細管電泳的基本原理,一起看正文。

四川省無菌檢驗員培訓(xùn)知識之高效毛細管電泳的基本原理
高壓液相色譜(HPLC)選用的毛細管一般內(nèi)徑約為50μm(20—200μm),外徑為375μm,有效長度為50cm(7—100cm)。毛細管兩端分別浸入兩分開的緩沖液中,同時兩緩沖液中分別插入連有高壓電源的電極,該電壓使得分析樣品沿毛細管遷移,當(dāng)分離樣品通過檢測器時,可對樣品進行分析處理。HPLC進樣一般采用電動力學(xué)進樣(低電壓)或流體力學(xué)進樣(壓力或抽吸)兩種方式。在毛細管電泳系統(tǒng)中,帶電溶質(zhì)在電場作用下發(fā)生定向遷移,其表觀遷移速度是溶質(zhì)遷移速度與溶液電滲流速度的矢量和。所謂電滲是指在高電壓作用下,雙電層中的水合陰離子引起流體整體地朝負極方向移動的現(xiàn)象;電泳是指在電解質(zhì)溶液中,帶電粒子在電場作用下,以不同的速度向其所帶電荷相反方向遷移的現(xiàn)象。溶質(zhì)的遷移速度由其所帶電荷數(shù)和分子量大小決定,另外還受緩沖液的組成、性質(zhì)、pH值等多種因素影響。帶正電荷的組份沿毛細管壁形成有機雙層向負極移動,帶負電荷的組分被分配至毛細管近中區(qū)域,在電場作用下向正極移動。與此同時,緩沖液的電滲流向負極移動,其作用超過電泳,最終導(dǎo)致帶正電荷、中性電荷、負電荷的組份依次通過檢測器。
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