微生物檢驗-細菌計數(二十五)
發(fā)布時間:2022-02-28瀏覽:1287
平板涂布法
將供試液涂布在瓊脂平板的表面,經培養(yǎng)后計數表面生長的菌落數,是平板菌落計數的另一種方法。本法使細菌不必經受溶化瓊脂熱力的影響,因此平板涂布法所測得的結果比傾注平板法為高。生長在瓊脂表面的菌落易于觀察也是本法的優(yōu)點。但由于接種(涂布)量較?。?.05~0.2ml),對含菌量的樣品,本法可能不夠準確。本法在日本藥局方十三改正版中收載。
設備和材料 同平板菌落計數法(傾注法),另需準備涂布樣品用的玻璃棒,(L 形,長約20cm,直徑3.5 mm,在棒前端3cm處彎成直角,兩端燒圓)。營養(yǎng)瓊脂平板需事先準備,即已滅菌的營養(yǎng)瓊脂,冷卻至適宜溫度時,傾注約15 ml 至滅菌平皿中,待凝固后將平板放50℃ 1.5~2h,使瓊脂表面干燥。
方法∶按平板菌落計數法制備供試液及稀釋液,可根據供試品染菌情況確定稀釋級的選擇。用一支滅菌吸管(0.1ml刻度),取0.1 ml待檢供試液加至營養(yǎng)瓊脂表面,立即用滅菌的L玻棒在表面均勻涂布,注意勿劃破瓊脂,對菌落觀察不利。每一個平板分別用1支L棒。經涂布的平板至少需 15min,使其表面干燥同平板菌落計數法培養(yǎng)、計數規(guī)則,按供試液的稀釋倍數和接種量計算菌落結果。