微生物檢驗-細(xì)菌計數(shù)（二十四）
發(fā)布時間:2022-02-27瀏覽：1296
儀器法
應(yīng)用儀器測定菌數(shù)是現(xiàn)代菌數(shù)檢測技術(shù)的一種發(fā)展動向。粒子計數(shù)器用于菌數(shù)檢測已有報道，但本法僅適用于無雜質(zhì)顆粒供試液的菌懸液計數(shù)，一般不適用于藥品的染菌量檢測，因為任一雜質(zhì)顆粒都會誤計在內(nèi)。下面作扼要介紹∶
粒子計數(shù)器的基本原理：電解溶液經(jīng)過有孔管的微孔時有電流，當(dāng)任何相對不導(dǎo)電的粒子通過微孔時，微孔內(nèi)電阻增大，使微孔切面上電壓增高，致使兩端電壓發(fā)生變化，通過微孔的每一粒子增大電壓可以被放大、記錄和計數(shù)。細(xì)菌細(xì)胞則屬不導(dǎo)電的粒子，可被計數(shù)。
粒子計數(shù)器的主體部分為有孔管，其余為電子測量和記錄部分。有孔管的孔徑有10μm、30μm、100μm等，可以根據(jù)粒子大小而選擇。有孔管的一端連結(jié)真空泵與水銀壓力計，水銀壓力計上裝有液量計測的電極接點。測定電極的正極在有孔管內(nèi)，負(fù)極在燒杯中。測定開始時，將有孔管置入被測菌懸液中，打開真空泵活塞、減壓、菌懸液進(jìn)有孔管內(nèi)，同時水銀壓力計上升。關(guān)閉活塞測定開始，水銀壓力計緩慢向左移動，相應(yīng)的流人菌懸液。其中計量決定于電極1和2的距離。電壓變化形成脈沖，經(jīng)放大后進(jìn)入示波器，計數(shù)。
粒子計數(shù)器的計數(shù)能力≥5×104/分，并能在若干秒內(nèi)按顆粒大小決定出分布。粒子計數(shù)器的最大缺點就是它只識別顆粒大小，而不能區(qū)分是否細(xì)胞，其次混合各種細(xì)胞時，測定誤差較單一菌株為大。
除粒子計數(shù)器外，應(yīng)用電路的阻抗特性變化，進(jìn)行細(xì)菌總數(shù)測定也有報道。菌數(shù)的檢測還有其他方法，例如比濁法、光密度法、菌體干重法、疊集細(xì)胞體積法等，但這些檢測法都要求較大菌量，不太適用于藥品染菌量的測定。