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寧夏回族自治區(qū)無菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)內(nèi)容之“菌落計數(shù)”技巧
發(fā)布時間:2024-10-13瀏覽:937

對于寧夏回族自治區(qū)無菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)學(xué)員來說,盡管“菌落計數(shù)”是個相對基礎(chǔ)、相對簡單的工作,但是在無菌檢驗(yàn)實(shí)操工作中仍然有許多技巧和竅門,本文為大家說說“菌落計數(shù)”技巧,一起看正文。

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一、寧夏回族自治區(qū)無菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)內(nèi)容之了解菌落形成單位和活菌數(shù)

菌落形成單位CFU(colony forming unit)用來估算固體或液體樣品中存活的細(xì)菌或真菌細(xì)胞數(shù)量的單位,通常以CFU/g或CFU/mL的形式表示。 
活菌數(shù)用CFU表示,表示在適宜的環(huán)境條件下,在固體培養(yǎng)基上生長繁殖所形成的菌落數(shù)。

但,菌落形成單位CFU并不等于實(shí)際活菌數(shù),而是對活菌數(shù)的估值。單菌落有可能由一個菌生長繁殖而成,也可能由多個菌生長繁殖而成,但,我們只計算一個,也認(rèn)為是一個菌生長繁殖而成。

二、按照什么標(biāo)準(zhǔn)去稀釋?

1.參考值

其實(shí),這個是最靠譜的方法,有個參考值就可以直接稀釋后涂布。這里的“參考值”有可能是估值,也可能是樣品本身標(biāo)注的值。對于有經(jīng)驗(yàn)的人,其實(shí)有沒有參考值,總是能夠計數(shù)。但,對于新手來說,如果沒有,根本無從下手。

2.擴(kuò)大計數(shù)范圍

比如,稀釋到10-8,感覺稀釋倍數(shù)差不多,涂布的時候選擇10-8,10-7,10-6,每個梯度三個平板。再選擇10-9,10-5,10-4,每個梯度一個平板,留個對照。即使菌落數(shù)計不出來,也能出個參考值、估測值。

3.巧妙利用光學(xué)顯微鏡

比如,稀釋到10-8,感覺稀釋倍數(shù)差不多,采用單染色法,在顯微鏡下觀察,如果沒有觀察到菌,稀釋倍數(shù)往前數(shù);如果能夠觀察到1~5個菌,就按照這個稀釋倍數(shù);如果大于5個菌,繼續(xù)稀釋一個梯度;如果看到一片,你清楚怎么處理。

4.巧妙利用血球計數(shù)板

比如,稀釋到10-8,感覺稀釋倍數(shù)差不多,用血球計數(shù)板大概看一下菌數(shù),推算菌落總數(shù),看是否符合計數(shù)要求。

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