培養(yǎng)基的配制是無菌檢驗(yàn)員培訓(xùn)基礎(chǔ)知識(shí)之一，是無菌檢驗(yàn)員需要具備和掌握的基本知識(shí)之一。本文基于《中國(guó)藥典2020》，為大家講解培養(yǎng)基的配制及管控要點(diǎn)。
微生物實(shí)驗(yàn)室使用的培養(yǎng)基可按培養(yǎng)基處方配制，也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定的脫水培養(yǎng)基配制，或直接采用商品化的預(yù)制培養(yǎng)基。
商品化的脫水培養(yǎng)基或預(yù)制培養(yǎng)基應(yīng)設(shè)立接收標(biāo)準(zhǔn)，并進(jìn)行符合性驗(yàn)收,包括品名、批號(hào)、數(shù)量、生產(chǎn)單位、外觀性狀(瓶蓋密封度、內(nèi)容物有無結(jié)塊霉變等)、處方和使用說明、有效期、貯藏條件、生產(chǎn)商提供的質(zhì)控報(bào)告和/或其他相關(guān)材料(如配方變更)。
制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分進(jìn)行配制。不應(yīng)使用結(jié)塊、顏色發(fā)生變化或其他物理性狀明顯改變的脫水培養(yǎng)基。
脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下貯藏，如低溫、干燥和避光，所有的容器應(yīng)密封，尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器。
為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠并符合要求，配制時(shí)，脫水培養(yǎng)基應(yīng)按使用說明上的要求操作，自制培養(yǎng)基應(yīng)按配方準(zhǔn)確配制。各脫水培養(yǎng)基或各配方組分稱量應(yīng)達(dá)到相應(yīng)的精確度。配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水。應(yīng)記錄各稱量物的重量和水的使用量。
配制培養(yǎng)基所用容器不得影響培養(yǎng)基質(zhì)量，一般為玻璃容器。培養(yǎng)基配制所用的容器和配套器具應(yīng)潔凈，可用純化水沖洗玻璃器皿以消除清潔劑和外來物質(zhì)的殘留。對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基，如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一般應(yīng)預(yù)先進(jìn)行滅菌，以保證培養(yǎng)基的無菌性。
配制時(shí)，培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解混勻，再行分裝與滅菌。若需要加熱助溶，應(yīng)注意不要過度加熱,以避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其他組分時(shí)，加入后應(yīng)充分混勻。
培養(yǎng)基應(yīng)采用經(jīng)驗(yàn)證的滅菌程序滅菌。商品化的預(yù)制培養(yǎng)基必須附有所用滅菌方法的資料。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù)，特殊培養(yǎng)基可采用薄膜過濾除菌等技術(shù)。
培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件，有可能引起顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH值的改變。因此，培養(yǎng)基應(yīng)采用驗(yàn)證的滅菌程序滅菌，培養(yǎng)基滅菌方法和條件，可通過無菌性試驗(yàn)和適用性檢查(或靈敏度檢查)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。
應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值(冷卻至25℃左右測(cè)定)。若培養(yǎng)基處方中未列出pH值的范圍，除非經(jīng)驗(yàn)證表明培養(yǎng)基的pH值允許的變化范圍很寬，否則，pH值的范圍不能超過規(guī)定值土0.2。如需滅菌后進(jìn)行調(diào)整，應(yīng)使用滅菌或除菌的溶液。
自配的培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱、批號(hào)、配制日期、制備人等信息，并在已驗(yàn)證的條件下貯藏。商品化的預(yù)制培養(yǎng)基應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用說明書上的要求進(jìn)行貯藏，所采用的貯藏和運(yùn)輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基最低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù)。
培養(yǎng)基滅菌后不得貯藏在高壓滅菌器中，瓊脂培養(yǎng)基不得在0℃或o℃以下存放，因?yàn)槔鋬隹赡芷茐哪z特性。培養(yǎng)基保存應(yīng)防止水分流失，避光保存。瓊脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如置冰箱保存，-般不超過1周，且應(yīng)密閉包裝，若延長(zhǎng)保存期限，保存期需經(jīng)驗(yàn)證確定。
所有配制好的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)目是pH值、適用性檢查或靈敏度檢查試驗(yàn)，定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期。培養(yǎng)基在有效期內(nèi)應(yīng)依據(jù)適用性檢查試驗(yàn)確定培養(yǎng)基質(zhì)量是否符合要求。
除藥典通則另有規(guī)定外，在實(shí)驗(yàn)室中，若采用已驗(yàn)證的配制和滅菌程序制備培養(yǎng)基且過程受控，那么同一批脫水培養(yǎng)基的適用性檢查試驗(yàn)可只進(jìn)行1次。如果培養(yǎng)基的制備過程未經(jīng)驗(yàn)證,那么每一滅菌批培養(yǎng)基均要進(jìn)行適用性檢查或靈敏度檢查試驗(yàn)。試驗(yàn)的菌種可根據(jù)培養(yǎng)基的用途從相關(guān)通則中進(jìn)行選擇，也可增加生產(chǎn)環(huán)境及產(chǎn)品中常見的污染菌株。
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